PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

ABSTRACT.- Brum M.C.S., Weiblen R., Flores E.F, Tobias F.L., Pituco E.M. & Winkelmann E.R. 2002. [Fetal protection against challenge with bovine viral diarrhea vírus (BVDV) in pregnant ewes immunized with two strains experimentally attenuated.] Proteção fetal frente a desafio com o vírus da Diarréia Viral Bovina (BVDV) em ovelhas prenhes imunizadas com duas amostras de vírus atenuadas experimentalmente. Pesquisa Veterinária Brasileira 22(2):64-72. Depto Medicina Veterinária Preventiva, Centro de Ciências Rurais, Universidade Federal de Santa Maria (DMVP/CCR/UFSM), Santa Maria, RS 97105-900, Brazil. E-mail: flores@ccr.ufsm.br Two isolates of bovine viral diarrhea virus (BVDV) submitted to multiple passages in tissue culture associated with ultraviolet irradiation were evaluated as vaccine virus candidates. The attenuation of the modified viruses was assessed in calves and in pregnant ewes. Intramuscular inoculation of the viruses in four seronegative calves produced only a mil d and transient rise in body temperature, followed by the production of high titers of neutralizing antibodies. The viruses were not detected in nasal secretions or in the blood following inoculation. However, intramuscular inoculation of these viruses in four pregnant ewes resulted in transplacental transmission and infection of ali fetuses. To assess fetal protection conferred by immunization, pregnant ewes immunized twice with the modified viruses were subsequently challenged by intranasal inoculation of BVDV-1 (SV-126.8, n=6) or BVDV-2 (SV-260, n=5). At the day of challenge (134 days after the second immunization), ali ewes had high titers of neutralizing antibodies (256 to >4096) to the vaccine viruses and variable titers (8 to >4096) to Brazilian BVDV-1 and BVDV-2 field isolates. Fifteen days after challenge, the ewes were euthanized and fetal tissues were examined for infectivity. Ali fetuses from non-vaccinated, challenged ewes (n=4) were infected. In contrast, none of the fetuses from the immunized dams (n = 11) were positive for virus, indicating that the immunological response induced by immunization with the vaccine candidate viruses was capable of preventing fetal infection. These results indicate that it is possible to achieve fetal protection to BVDV by induction of a strong immunological response using modified live vaccines.

• Bovine viral diarrhea virus BVDV vaccine fetal protection sheep Vírus da Diarréia Viral Bovina vacina proteção fetal ovelhas.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Brum M.C.S., Weiblen R., Flores E.F, Tobias F.L., Pituco E.M. & Winkelmann E.R. 2002. [Fetal protection against challenge with bovine viral diarrhea vírus (BVDV) in pregnant ewes immunized with two strains experimentally attenuated.] Proteção fetal frente a desafio com o vírus da Diarréia Viral Bovina (BVDV) em ovelhas prenhes imunizadas com duas amostras de vírus atenuadas experimentalmente. Pesquisa Veterinária Brasileira 22(2):64-72. Depto Medicina Veterinária Preventiva, Centro de Ciências Rurais, Universidade Federal de Santa Maria (DMVP/CCR/UFSM), Santa Maria, RS 97105-900, Brazil. E-mail: flores@ccr.ufsm.br Duas amostras do vírus da Diarréia Viral Bovina (BVDV) submetidas a múltiplas passagens em cultivo celular e exposição à radiação ultravioleta (UV) a cada passagem foram avaliadas como candidatos a vírus vacinais. As amostras foram testadas quanto à sua atenuação para bezerros e fetos ovinos, reatividade antigênica contra isolados de campo, e capacidade de induzir proteção fetal em ovelhas prenhes. Inoculação intramuscular (IM) dos vírus modificados em quatro bezerros produziu apenas uma elevação discreta e passageira da temperatura corporal, seguida de produção de altos títulos de anticorpos neutralizantes. O vírus não foi detectado em secreções nasais ou sangue nos dias seguintes à inoculação. Porém, a inoculação IM desses vírus em quatro ovelhas prenhes foi seguida de transmissão transplacentária e infecção em todos os fetos. Para os testes de proteção fetal, ovelhas prenhes previamente imunizadas com duas doses vacinais, foram inoculadas por via intranasal com amostras de BVDV-1 (SV-126.8, n=6) ou BVDV-2 (SV-260, n=5). No dia do desafio (134 dias após a segunda dose), todos os animais apresentavam altos títulos de anticorpos neutralizantes (256 a >4096) contra os vírus vacinais; além de títulos variados (8 a >4096) contra várias isolados brasileiros de BVDV-1 e BVDV-2. Quinze dias após o desafio, as ovelhas foram sacrificadas e os tecidos fetais foram examinados para a presença de vírus. Todos os fetos das ovelhas controle não-vacinadas apresentaram-se (n=4) positivos para os vírus utilizados no desafio. Em contraste, nenhum feto das ovelhas imunizadas (n = 11) foi positivo para vírus, indicando que a resposta imunológica induzida pela vacinação com os vírus modificados foi capaz de prevenir a infecção fetal. Estes resultados indicam que é possível obter-se forte resposta imunológica e proteção fetal contra o BVDV com o uso de vacinas vivas modificadas.

Abstract in English:

The evolution of colostral antibodies to bovine leukemia virus (BLV) was examined by testing serum samples of female calves collected from birth to 270 days of age. To observe the levels of BLV-specific antibodies in dams in the peri-natal period, sérum samples were collected between days 35 pre-partum and days 28 post-partum. The presence of antibodies was examined by agar gel immunodiffusion tests (AGID). One week after ingestion of colostrum 100% (49/49) of the heifers gave positive results for BLV antibodies. The number of antibodiy-positive heifers decreased progressively until animais became sem-negative by day 180 of age. From the 41 sem-positive dams tested during the peri-natal period, three (7.3%) became sem-negative at that time. These data suggest that serologic diagnostic of BLV infectious with AGID should be performed after the 6th month of age in calves in order to avoid false-positive results due to passively acquired maternal antibodies. Moreover, serologic diagnosis in pregnant cows between 2 weeks pre and 4 weeks "post-partum" may give rise to false-negative results.

• Bovine leukemia vírus colostral immunity

Abstract in Portuguese:

A presença de anticorpos colostrais contra o vírus da leucose bovina (BLV), foi examinada através de análise de amostras de soro de terneiras coletadas desde o nascimento até 270 dias de idade. Também foram coletadas amostras de soro de vacas entre 35 dias antes do parto até 28 dias após o parto. As amostras foram examinadas pelo teste de imunodifusão em gel de ágar (IDGA). Uma semana após a ingestão de colostro, 100% (49/49) das terneiras apresentaram anticorpos para o BLV. Posteriormente, houve uma queda progressiva do número de animais soropositivos, com o desaparecimento de níveis detectáveis de anticorpos até que todas as terneiras se tornassem soronegativas aos 180 dias de idade. De 41 vacas analisadas durante o período peri-parto, 3 (7,3%) apresentaram- se sorologicamente negativas neste período. Nas terneiras, os testes deverão ser realizados após o 6 mês de idade a fim de evitar resultados falso-positivos devido a anticorpos maternos passivamente adquiridos. Sugere-se também que para diagnóstico de infecções pelo BLV, a prova de IDGA seja realizada, nas vacas prenhes, somente até duas semanas antes do parto ou após 1 mês do parto.

• Vírus da leucose bovina imunidade colostral